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人Elisa試劑盒檢測原理

更新時(shí)間:2016-10-28      點(diǎn)擊次數:2813
人Elisa試劑盒應用定性?shī)A心免疫檢測技術(shù),用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強的肽段,分別來(lái)自于該毒株的開(kāi)放閱讀框2和開(kāi)放閱讀框3。將樣品或標準品加入孔中并孵育,如果其中存在HEVIgM抗體,這些抗體就會(huì )與HEV的多肽抗原結合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過(guò)氧化物酶)酶結合物,經(jīng)第二次孵育后,酶結合物就會(huì )與*次孵育結合上的HEVIgM抗體相結合,洗板除去未結合的酶結合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時(shí)會(huì )發(fā)生酶-底物反應,只有那些含有HEVIgM抗體和酶結合物所形成的復合物的孔才會(huì )發(fā)生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應,并在波長(cháng):450nm處測量O.D.值,按照人Elisa試劑盒的測試標準,O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認為是初試陽(yáng)性.
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